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高性能杂交瘤融合筛选培养基
所属类别：特色试剂
描述：
详细介绍
鼠杂交瘤技术是一种将致敏小鼠脾脏B淋巴细胞与瘤细胞在体外融合为“能够无限增殖并持续表达抗体”杂合细胞的技术。该技术作为一种经典的抗体制备技术是各大实验室的首选。
小鼠杂交瘤单抗技术
在杂交瘤单抗制备过程中最重要的实验环节当属脾细胞与瘤细胞之间的细胞融合。一个好的融合效果取决于两个因素：一是融合方法；二是融合完成后杂交瘤细胞的培养及筛选；
关于融合方法，业界最为广泛使用的方法是低分子量PEG介导融合，该法简单易行，且成本低廉。也有部分实验室使用电融合仪提高融合效率的。
关于融合后杂交瘤细胞的培养及筛选，则是仁者见仁、智者见智。由于新生杂交瘤较为脆弱，因此采用合适的培养条件是促进杂交瘤克隆成团的关键。最为经典的方法是在杂交瘤培养过程中共培养“饲养层细胞”，饲养层细胞一般来源于小鼠腹腔巨噬细胞，虽然效果不错，但存在取材麻烦、牺牲动物且易污染等缺点。因此现阶段一种可行的方法是使用杂交瘤添加因子替代饲养层细胞以支持脆弱新生杂交瘤细胞的克隆成团。
市售杂交瘤添加因子一般价格昴贵（部分厂家100ml添加因子高达2000元），而且使用效果不佳，主要体现在新生杂交瘤不长或克隆团较少，而且或有的杂交瘤克隆团发黑（显微镜下不透光）、萎缩、快速调亡。出现这些现象的根本原因在于未能深刻洞悉杂交瘤成活的关键因素。
鉴于以上各种痛点问题，本公司潜心研发，测试、评价、筛选了多种利于杂交瘤细胞成活成团的添加因子及条件培养基，将这些关键组分添加至正常筛选组分培养基（通常是DMEM或1640+血清+HAT+双抗）后能够极高效、极便捷、极稳定的促进杂交瘤细胞的成活及生长。
产品说明
产品信息 | |
中文名称 | 高性能杂交瘤融合筛选培养基 |
英文名称 | High-Performance Hybridoma fusion selection medium |
货号 | Abt-HFSM-01 |
规格 | 500ml/瓶 |
产品组分 | DMEM基础培养基：80%（体积比） 进口胎牛血清：10%（体积比） 条件培养基：10%（体积比） 青霉素：100 单位/mL 链霉素：100 单位/mL 次黄嘌呤（Hypoxanthine）：100uM 胸腺嘧啶核苷（Thymidine）：16uM 氨基蝶呤（Aminopterin）：0.4uM 其它添加物：多种细胞因子（足量）及添加剂 |
保存条件 | -20℃避光保存，有效期18个月。 |
使用方法 | ①、37℃水浴融化本培养基，乙醇消毒外表面后置超净台备用； 注：本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象，静置3-5min使其沉至瓶底，然后吸取上清使用即可。 ②、使用物理（电融合）或化学（常规PEG）的方法完成细胞融合，然后使用本培养基直接重悬融合细胞，以合适的密度（电融合推荐：1E4细胞/孔-2E4细胞/孔；PEG融合推荐：5E4细胞/孔-1E5细胞/孔）和体积（推荐：200ul/孔）铺96孔板，置37℃ 5% CO2培养箱静置培养。 ③、融合后的第4-8天，根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养； ④、当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测； |
注意事项 | ①. 本产品有一定毒性，仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养，不可用于培养活体动物、诊断或治疗药物用。 ②. 本产品适用于HGPRT筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养，不适用于TK或其它选择系统的细胞培养。本品不能用于直接培养HGPRT缺陷细胞（如NS1, SP2/0等）。 ③. 本产品为无菌溶液，pH为7.2~7.4，取用需在无菌条件下进行。 |
基本信息
产品使用效果展示：
1、融合孔杂交瘤生长情况
2、融合孔间接ELISA检测
项目一：某重组蛋白为免疫原，使用本公司HFSM-01培养基融合后间接ELISA筛选结果
项目二：某KLH-肽偶联物为免疫原，使用本司HFSM-01培养基融合后间接ELISA筛选结果
实验室小伙伴直呼效果太好直至让人窒息，因为阳性克隆孔实在是太多了。